大鼠Ⅲ型膠原  （ELISA）試劑盒

主要設(shè)備

試劑

(1) 包被緩沖液（pH9.60.05M 碳酸鹽緩沖液）：

Na2CO3 1.59g

碳酸氫鈉 2.93g

加入蒸餾水至 1000ml

（2）洗滌緩沖液（PH7.4PBS）：0.15M

K2PO4 0.2g

Na2HPO4 12H2O 2.9g

氯化鈉 8.0g 0.2g

Tween-20 0.05% 0.5ml

加入蒸餾水至 1000ml

(3) 稀釋劑：

牛血清白蛋白 (BSA) 0.1 克

加入洗滌緩沖液至 100ml

或用山羊血清、兔血清等血清和洗滌液補(bǔ)足5-10%。

(4) 終止液（3M H2SO4）：

滴加蒸餾水178.3ml、濃硫酸（98%）21.7ml。

(5)底物緩沖液(PH5.0磷酸棗檸檬酸)：

0.2MNa2HPO4 (28.4g/L) 25.7ml

0.1M檸檬酸（19.2g/L）24.3ml

加入 50ml 蒸餾水。

(6)TMB(四甲基聯(lián)苯胺)溶液：

TMB（10mg/5ml 無(wú)水乙醇）0.5ml

底物緩沖液 (PH5.5) 10ml

0.7%H2O2 32μl

(7 ABTS使用液：

ABTS 0.5mg

底物緩沖液 (PH5.5) 1ml

3%H2O2 2μl

(8)抗原、抗體和酶標(biāo)抗體。

(9)正常人血清和陽(yáng)性對(duì)照血清。

利用

ELISA的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固定化和抗原或抗體的酶標(biāo)記。固相載體表面結(jié)合的抗原或抗體仍保留其免疫活性，而酶標(biāo)抗原或抗體同時(shí)保留其免疫活性和酶活性。在測(cè)量過(guò)程中，測(cè)試樣品（其中的抗體或抗原）與固體支持物表面的抗原或抗體發(fā)生反應(yīng)。在固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物通過(guò)洗滌與液體中的其他物質(zhì)分離。然后加入酶標(biāo)抗原或抗體，也通過(guò)反應(yīng)與固相載體結(jié)合。此時(shí)，固相上酶的量與樣品中被測(cè)物質(zhì)的量成正比。加入酶反應(yīng)的底物后，底物被酶催化成有色產(chǎn)物，產(chǎn)物的多少與樣品中被測(cè)物質(zhì)的多少直接相關(guān)，因此可以進(jìn)行定性或定量分析根據(jù)顏色深度。由于酶的高催化效率，間接放大了免疫反應(yīng)的結(jié)果，并且該測(cè)定方法達(dá)到了高靈敏度。 ELISA 可用于測(cè)量抗原和抗體。

組成結(jié)構(gòu)

1、 血清：操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血紅細(xì)胞迅速小心地分離。

2、 血漿：EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測(cè)。1000×g離心30分鐘去除顆粒。

3、 細(xì)胞上清液：1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。

4、 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘，取上清液。

5、 保存：如果樣品不立即使用，應(yīng)將其分成小部分-70℃保存，避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測(cè)前先離心或過(guò)濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

此IBL試劑盒能用于小鼠血清,EDTA血漿,細(xì)胞上清中白介素-6的定量檢測(cè)

同產(chǎn)品展示：